• Eddie Redmayne como Newt Scamander, un empleado del Ministerio de Magia británico en la División de Bestias del Departamento de Regulación y Control de Criaturas Mágicas, así como un magizoólogo autoproclamado. Jugó un papel importante en la reparación de los eventos de un violento ataque en la ciudad de Nueva York en diciembre de 1926 que involucró a Gellert Grindelwald. Es un confidente de Albus Dumbledore, a pesar de ser un paria de ciertos círculos de la Comunidad Mágica Británica debido a su accidentado pasado.
• Katherine Waterston como Porpentina «Tina» Goldstein: una aurora del Magicongreso Único de la Sociedad Americana (MACUSA) y eventual esposa de Newt.
• Dan Fogler como Jacob Kowalski: un veterano Muggle de la Primera Guerra Mundial, dueño de una panadería, así como amigo de Newt y antiguo amante de Queenie. En esta entrega, Jacob tendrá su propia varita mágica.
• Alison Sudol como Queenie Goldstein: la hermana menor de Tina, y antigua empleada de MACUSA, además de una practicante de la legeremancia. Después de estar convencida de que Grindelwald hará realidad su sueño de casarse con Jacob, se une a él y abandona a su hermana y amigos.
• Ezra Miller como Credence Barebone/Aurelius Dumbledore: el hijo adoptivo perturbado de Mary-Lou Barebone, además de un Obscurus. Es severamente abusado y oprimido.
• Callum Turner como Theseus Scamander: hermano mayor de Newt, que es considerado un «héroe de guerra» por su demostración de valentía en la Primera Guerra Mundial; perdió a su prometida Leta Lestrange en septiembre de 1927, después de que ella se sacrificara en el mitin de Grindelwald en Pere Lachaise, París, para salvar a los hermanos Scamander.
• William Nadylam como Yusuf Kama: un mago francés de ascendencia senegalesa y aliado de Newt, que previamente intentó matar a Credence mientras creía que era su medio hermano Corvus.
• Poppy Corby-Tuech como Vinda Rosier: leal seguidora de Grindelwald.
• Jessica Williams como la profesora Eulalie «Lally» Hicks: profesora de la Escuela Ilvermorny de Magia y Hechicería.
• Jude Law como Albus Dumbledore: un influyente mago que se desempeña como profesor de Defensa Contra las Artes Oscuras en el Colegio Hogwarts de Magia y Hechicería. Mantiene un pacto de sangre con Grindelwald, con quien tuvo una relación cercana cuando era adolescente, lo que les impide enfrentarse en duelo.
• Mads Mikkelsen como Gellert Grindelwald: un poderoso mago tenebroso que ha causado el terror y caos en todo el mundo mágico, debido a que busca liderar un nuevo Orden Mundial Mágico basado en su fuerte creencia en la superioridad mágica, aunque también está muy por debajo de los actos que cometería en años posteriores el mismo Tom Riddle. Tuvo una relación cercana con Dumbledore cuando era adolescente. Mikkelsen reemplaza a Johnny Depp, quien interpretó al personaje en las películas anteriores. Al reemplazar a Depp, Mikkelsen señaló que sería un «suicidio creativo» copiar las representaciones de Depp o Colin Farrell como Grindelwald, después de haber desarrollado su propia versión del personaje, y admitió que debería ser necesario un «puente» entre la actuación de Depp y el suyo, habiendo sido fan de Depp desde sus primeras películas.
• Victoria Yeates como Bunty: asistente de Newt Scamander.
• Maria Fernanda Cândido como Vicência Santos: candidata la jefa suprema de la Confederación Internacional de Magos.
• Oliver Masucci como el director de la Confederación Internacional de Magos.